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【贵州生物实验企业】: 大鼠嗅球切除动物模型
发布时间:07月27日 浏览:957   [ ] 视力保护色:
(1)复制方法

1)手术方法  雄性大鼠,体重为250~300g,手术前至少3~4d每日数次的抚摸。将大鼠分组,以水合氯醛(按350~400mg/kg体重的剂量)或戊巴比妥钠(按50~60mg/ kg体重的剂量)经腹腔注射麻醉后,剪除头颈部毛发,皮肤常规消毒。固定动物在立体定位仪上,两耳线中点纵向将皮肤切开,暴露颅骨。在冠状缝和矢状缝交点向前7mm、旁开2mm处用牙钻分别钻两个2mm直径的小孔。用探针向下向前破坏嗅球后用真空泵吸出。用止血海绵填充小孔(或用牙托粉水泥封孔),缝合皮肤,肌肉注射青霉素钠盐(每只4万U连续注3d)。每组动物按实验设计每天分别给予待测药物或生理盐水。术后14d左右即可进行实验。

实验前应预先剖解1~2只动物观察并测定钻孔位置,吸除嗅球时应小心不要损伤额叶皮层。实验结束后应剖解所有去嗅球动物以证实是否完全摘除嗅球。
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2)测试方法

①被动回避实验

跳台被动回避  电击箱(30cm×30cm×28cm)底部为金属栅条可通电,箱内有一跳台(7cm×30cm×4.5cm)。将大鼠先置于电击箱内(不予电击)使之熟悉环境1min,然后将大鼠放在平台上,一旦大鼠触及金属栅条就遭遇0.6mA的电刺激,直到大鼠在平台上连续呆上3min或遭遇10次电击为止。记录至此时大鼠遭电击的总次数。大鼠嗅球切除后遭受电击的次数明显增多,反映了嗅球切除可引起被动回避反应的欠缺。给予抗抑郁药后,可减少动物遭电击的次数。避暗被动回避实验箱由明暗两室组成,两室底部为不锈钢栅条,条间距离为1cm。两室的隔板底部中央有一通道(7cm×7cm)供大鼠出入。暗室的不锈钢栅条与电刺激仪相联,如果大鼠进入暗室,则遭遇电击。将大鼠先放入暗室,并给予一次电击,大鼠将逃至明室,当大鼠重新进入暗室时,将再次受到电击,此时记录为1次,直到大鼠在明室连续呆上2min遭受电击达20次,记录此时大鼠遭受电击的总次数。

②主动回避实验  实验箱内设有条件刺激装置,为光刺激(实验箱两长侧壁的底部装有红外光电管);底部为不锈钢栅条,与电击装置相连,为非条件刺激(电击刺激)。实验包括60个试行周期,每个周期分为条件刺激期、非条件刺激期及间歇期。如果大鼠在条件刺激期移动并切断两端的光束,则可避免电击,记录为“回避反应”。如果在非条件刺激期切断光束,则电击马上终止,记录为“逃避反应”。如果切断光束发生于间歇期,则记录为“自发反应”。大鼠嗅球切除后,回避反应次数明显增多,逃避失败次数显著降低,表明嗅球切除后主动回避反应能力增强。当给予抗抑郁药后,主动回避反应能力遭破坏。

(2)模型特点与比较医学  由于嗅球与边缘系统功能有关,影响行为、情绪和内分泌,因此大鼠切除双侧嗅球后被动回避学习能力下降、自主活动能力增多、主动回避反应能力增强等。这些反应部分与嗅球切除后通过改变不同脑区5-HT能系统功能有关,抗抑郁药能特异性地逆转这些行为变化。此模型的抑郁效果明显、可靠性好,且抑郁动物的病理生理学改变与人类抑郁相似,对检测抗抑郁剂有较高的选择价值,常用于抗抑郁药的次筛以及作用机制的研究。其缺点在于对实验中手术技术的要求高和动物的死亡率较高。术前术后的每日

抚摸对于减少术后动物的易怒性及测试时的行为差异很重要。
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