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ELISA试剂盒探针的长度
发布时间:11月19日 浏览:2299   [ ] 视力保护色:
ELISA试剂盒杂交液内除含一定浓度的标记探针外,还富含较高浓度的盐类、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛血清白蛋白及载体DNA或RNA等。
杂交液中富含较高浓度的Na+可使杂交率添加,能够减低探针与安排标本之间的静电联系。甲酰胺可使Tm下降,杂交液中含每1%的甲酰胺可分别使RNA:RNA,RNA:DNA,DNA:DNA的杂交温度下降0.35℃,0.5℃和0.65℃。所以,杂交液中加入适当的甲酰胺,可防止因杂交温度过高而导致的安排形态构造的损坏以及标本的掉落。硫酸葡聚糖能与水联系,然后减少杂交液的有用容积,进步探针有用浓度,以到达进步杂交率的意图(特别对双链核酸探针)。在杂交液中加入牛血清白蛋白及载体DNA或RNA等,都是为了阻断探针与安排构造成分之间的非特异性联系,以减低布景。
ELISA试剂盒探针的长度:
通常应在50-300个碱基之间,最长不宜超越400个碱基。探针短易进入细胞,杂交率高,杂交时间短。ELISA试剂盒 防止污染:
因为在手指肌肤及试验室用玻璃器皿上均也许富含RNA酶,为防止其污染影响试验成果,在全部杂交前处理进程中都需要戴消毒手套,试验所用玻璃器皿及镊子都应于试验前一日置高温烘烤(180℃)以到达消除RNA酶的意图。杂交前及杂交时所用的溶液均需经高压消毒处理。
双链DNA探针和靶DNA的变性:
杂交反响进行时,探针和靶核酸都有必要是单链的。如果用双链DNA探针进行杂交(包含检查RNA时),双链DNA探针在杂交前有必要进行变性。探针变性后要马上进行杂交反响,否则解链的探针又会重新复性。
ELISA试剂盒探针的浓度:
探针浓度依其品种和试验请求略有不同,通常为0.5-5.0μg/ml(0.5-5.0ng/μl)。最适合的探针浓度要经过试验才干断定。
 
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